CONTINIOUS SINGLE CULTURE ® CSCM

Описание

Continuous Single Culture® (CSCM) предназначен для использования во вспомогательных репродуктивных процедурах, которые включают в себя манипуляцию гамета и эмбрионов. Эти процедуры включают в себя использование CSCM в качестве культуральной среды, начиная с оплодотворения и до 5-6 дня развития.

Гарантия качества

• CSCM это среда с фильтрованной оболочкой и асептически обработана в соответствии с производственными процедурами, которые были утверждены , что бы соответствовать уровню гарантии стерильности (SAL) 10-3.
• Каждый лот CSCM тестируется на:
• Методологию Endotoxin by Limulus Amebocyte Lysate (LAL)
• Биологическая совместимость по Анализу мышиного эмбриона (одна клетка на расширения бластоцист после 96 часов ).
• Стерильность по действующему тесту на стерильность (USP) <71>
• Анализ на выживание человеческой спермы (HSSA) на 24 часа.
  
• Все результаты анализа указываются на определенном Сертификате анализа лота, который доступен по запросу.
  

Система буфера

• Среда CSCM использует бикарбонат натрия в качестве буферной системы.
• Это специально разработано для использования в CO2 инкубаторе.
  

Инструкция по применению

Добавление белка

• Среда CSCM не содержит компоненты белка. Общая лабораторная практика включает добавление белка в использования этой среды.
• Количество белковой добавки может меняться в зависимости от лаборатории и зависит от фазы обработки / выращивания гамет и эмбрионов.
• Проконсультируйтесь с Вашими индивидуальными лабораторными протоколами.

Ниже приведены рекомендации по белковой добавке основанные на инструкции по применению CSCM:

• Для оплодотворения и культивирования эмбрионов: При использовании альбумина человеческой сыворотки от Ирвайн Сайнтифик (HSA), 100 мг / мл раствора, используют в дозе 5 мг / мл.
• Для 10 мл среды, добавить 0,5 мл HSA раствора на 9,5 мл среды.
• При использовании Serum Substitute Supplement (SSS) от Ирвайн Сайнтифик, 50 мг /мл раствора белка, используют на 10% (об / об).
• Для 10 мл среды, добавить 1,0 мл SSS на 9,0 мл среды.
  

Уравновешивание

• Перед использованием, в течение ночи, среда CSCM (с добавлением белка) должна быть предварительно нагрета до 37 °С и уравновешена до нужного рН 5-6% в СО2 инкубаторе.
• Достаточный объем среды с добавленным белком требуется для того чтоб могли быть приготовлены чашки для восстановления ооцитов, осеменения и культивирования эмбрионов.
  
• Ниже приведены общие процедуры для инструкции по применению CSCM.

Оплодотворение:

• За день до забора ооцитов, подготовьте чашку для сбора и осеменение со средой CSCM в которую предварительно добавили белок, накрыли маслом и предварительно в течение ночи уравновесили до 37 ° C. в СО2 инкубаторе.
• Сразу же после сбора и идентификации ооцитов, поместите ооциты на чашку для сбора ооцитов вместе с предварительно подготовленной средой и верните обратно в инкубатор на желаемый период (1-4 часа) перед инсеминацией обычной процедуры ЭКО или ИКСИ.

Обычная процедура ЭКО (использует блюдца для инсеминации):

1. Рекомендуется в асептических условиях дозировать 50000-100000 /мл подвижных сперматозоидов в микрокапле, содержащей 1-3 ооцитов.
2. Вернуть чашку для инсеминации в инкубатор. После инсеминации в течении 16-20 часов проверить нормально ли протекает оплодотворения.

Интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида (ИКСИ):

1. Не менее чем через 1 час после оголения ооцитов (и не больше чем через 4 часа после извлечения яйцеклеток), извлечь оголенные ооциты из инкубатора и оплодотворить их спермой по стандартному протоколу ИКСИ индивидуально для вашей лаборатории.
2. Сразу же после осеменения, поставьте 1-3 оплодотворенных ооцита в свежей капле в чашке для оплодотворения, которая предварительно была уравновешена. Верните чашку обратно в инкубатор и в течение 16-20 часов после осеменения проверяйте, нормально ли проходит оплодотворение.

Культивирование эмбриона:

• В день оплодотворения (за один день до оценки оплодотворения), подготовить чашку для культивирования эмбрионов со средой CSCM в которой предварительно добавили белок, покрыли маслом и предварительно в течение ночи довели до 37 ° в 5-6% СО2 инкубаторе.
• После оценки оплодотворения и определения наличия нормального оплодотворения (два пронуклеуса и два полярных тела), перенесите 2 зиготы пронуклеуса в предварительно подготовленную чашку для культивирования с заранее подготовленной средой CSCM. Рекомендовано давать возможность эмбрионам расти в непрерывной и бесперебойной системе культивирования, без замены среды, до достижения желаемой стадии развития (до 5-6 дня развития).
• Если есть необходимость заменить среду для культивирования эмбриона после 3-го дня, после 48 часов культивирования эмбриона (оплодотворенных эмбрионов), эмбрионы должны быть перенесены в новую чашку с заранее подготовленной средой CSCM (с добавленным белком).
• Для получения дополнительной информации по использованию этих продуктов, каждая Лаборатория должна проконсультироваться со своими лабораторными процедурами и протоколами, которые были специально разработаны и оптимизированы для Вашей индивидуальной медицинской программы.
  

Противопоказания

• Среда CSCM содержит антибиотик Гентамицина Сульфат.
• Должны быть приняты соответствующие меры предосторожности, чтобы убедится, что пациент не чувствителен к этому антибиотику.

Код продукта	Наименование	Назначение	Объем
90164	Continuous Single Culture® (CSCM)	Вспомогательные репродуктивные процедуры	60 мл.

Назад в раздел