MULTIPURPOSE HANDLING MEDIUM™ - COMPLETE (MHM™-C)

Описание

Среда Multipurpose Handling Medium™ Complete (MHM™-C) предназначена для использования во вспомогательных репродуктивных процедурах, которые включают манипуляцию гамет или эмбрионов. В частности, среда Multipurpose Handling Medium ™Complete (MHM ™-C) показана для использования в качестве среды для обработки ооцитов во время процедур аспирации фолликулов (не для смыва фолликулов), для промывки спермы до процедур оплодотворение ЭКО и ИКСИ, и для переноса эмбриона в матку во время процедуры переноса эмбриона.

Гарантия качества

• MHM ™ -C это среда для манипуляций, с фильтрованной оболочкой и асептически аброботана в соответствии с производственными процедурами, которые были утверждены, чтоб соответствовать уровню гарантии стерильности (SAL) 10-3.
• Каждый лот среды MHM™-C тестируется на:
• Методологию Endotoxin by Limulus Amebocyte Lysate (LAL)
• Биологическая совместимость по Анализу мышиного эмбриона (одна клетка на ≥80% расширения бластоцист после 96 часов ).
• Стерильность по действующему тесту на стерильность (USP) <71>
• Анализ на выживание человеческой спермы (HSSA) (≥ 70% подвижности на 24 часа).
  
• Все результаты анализа указываются на определенном Сертификате анализа лота, который доступен по запросу.

Система буфера

• MHM™-C использует систему буферов HEPES (N-2-гидроксиэтилпиперазин-N'-2-этансульфоновой кислоты), MOPS (3 Morpholinopropane-1-сульфоновой кислоты) и сочетания Бикарбонат Натрия.
• Эта система буферов обеспечивает поддержание рН на физиологическом уровне (от 7,2 до 7,4) и не требует использование CO2 инкубатора.

Добавление белка

• Среда MHM™-C содержит 5 мг/мл человеческого сывороточного альбумина (HSA).
• Перед использованием не требует добавление белка.
  

Инструкция по применению

Ниже приведены общие процедуры для использования MHM™-C.

Промывка спермы:

1. Нагреть среду до комнатной температуры или 37 ° С.
2. Позволить сперме разжижиться при комнатной температуре в течение 20 до 30 минут.
3. Используя асептические методы, перенесите сжиженную сперму в стерильную 10 мл коническую пробирку для центрифуги, добавьте 2 к 3 объема MHM™-C комнатной температуры (для примера, 2 мл спермы требует от 4 до 6 мл среды). Объем смеси среды для спермы должен быть больше 5 мл, разделить на две стерильные конические пробирки для центрифуги, минимизируйте объем на пробирку 4 - 6 мл, извлечение спермы будет максимальным. Образцы, имеющие высокую вязкость, могут потребовать дальнейшей обработки, чтобы обеспечить полное восстановление спермы. (См. раздел специальных соображении обработки).
4. Пробирки комнатной температуры поместить в центрифугу на 10 минут, используя силу в 200-300 хG.
5. Используя стерильную пипетку, снимите и выбросьте супернатант над "гранулами спермы" применяя аспирацию. Сперма потом должна быть ресуспендирована, осторожно стряхивая пробирку снаружи с помощи указательного пальца. (Примечание: Не используйте вихревой смеситель для этого этапа). Ресуспендируйте сперму в 1 до 2 мл свежей среды, резюмируйте и аккуратно перемешайте инверсируя образцы, которые были фракционированы для первого этапа центрифугирования, должны быть теперь объединены в одной пробирке.
6. Повторить центрифугу как в этапе 4.
7. Используя стерильную пипетку, снимите и выбросьте супернатант и осторожно приостановите осадок спермы взбалтывая в ручную. Добавить свежую среду до конечного объема в 0,5 мл. Сперма готова к вспомогательным репродуктивным процедурам. (Примечание: Общий объем небеременной матки 0,25 - 0,50 мл).

Специальная обработка отходов

• Переработка образца очень вязкой спермы:

Некоторые образцы, естественно, очень вязкие, даже после разжижения. Эти образцы имеют консистенцию тяжелого сиропа, и могут быть одними из наиболее трудно перерабатываемыми.

1. После того как среда добавлена эакуляту, осторожно удалите и выбросите смесь используя иглу 18 калибра и шприц. Это "выстрижет" некоторое кол-во вязкой слизистой.
2. Ограничьте среднее кол-во смеси среды и спермы с этапа 1, до 5 мл на пробирку для центрифугирования для первого этапа центрифугирования.
3. Если после предварительной обработки образца с иглой и Шприцом (Этап 1), сперма в обычном порядке не "осаждается" (сперма будет выглядеть как "облачное волокно” прикрепленное к нижней части пробирки центрифуги), тщательно удалите, как можно большую часть супернатанта, не нарушая "облачное волокно спермы", используя стерильную иглу и шприц.
   Это может быть сделано путем плотного держания скошенного края иглы к стенке пробирки центрифуги и медленно начать аспирацию от верхней части пробирки вниз. Когда было удаленно определенное кол-во супернатанта, насколько было возможно, добавьте 2 или 3 мл свежей среды. Повторите процесс используя иглу 18 размера и шприца. Повторите центрифугу смеси. Сперма должна осаждаться нормально после второй обработки.
4. На последующих сборах образцов, пациенту должно быть предложено, произвести разделение эякулята, который сведет к минимуму вязкость в большей части образца спермы.
   

• Извлечение ооцитов (не для промывки фолликул яичника):

Среда MHM ™-C может быть дополнена проверенным на качество фармацевтического, класса гепарин (2,5 - 10 единиц / мл), чтобы уменьшить свертывания фолликулярной аспирации, содержащей кровь.

1. Приведите среду до комнатной температуры или до 37 °С.
2. Собранные фолликулярные аспираты должны быть перенесены в пустую стерильную чашку.
3. Распознать ооциты и удалить их из фолликулярной жидкости и возможного загрязнения кровью с помощью стерильной пипетки с использованием предварительно промытой средой MHM ™-C.
4. Сполосните ооциты в разогретой среде MHM ™- C.
5. Поместите ооциты в уравновешенной среде для культивирования для дальнейшей манипуляции.

• Перенос эмбриона:

Перенос эмбрионов из среды для культивирования на 3 или 5 день:

1. На 3-й день или 5 день после оценки эмбрионов для развития, довезти среду MHM™-C, до комнатной температуры или до 37 ° С.
2. Установите стерильную чашку для промывки, содержащую предварительно нагретую среду MHM ™-C по одной для каждого набора эмбрионов.
3. Разместите 1,0 мл подогретой среды MHM ™-C, в лунку стерильной чашке с 1 лункой.
4. Поместите чашку для промывки на этап нагревания.
5. Промойте эмбрионы в чашке для промывки, 2-3 раза подбирая эмбрионы и перемещая их вокруг в лунке, в минимальном объеме подогретой среды MHM ™-C
6. После промывки, эмбрионы готовы для переноса в пациентку.

Меры предосторожности

• Это изделие предназначено для использования обученным персоналом в сфере репродуктивных процедурах. 
• Эти процедуры включают указанное применение, для которых это изделие предназначено. 
• Пользователь изделия несет ответственность за контроль продукта, и должен соответствовать национальным нормам контроля, где это применяется. 

Код продукта	Наименование	Назначение	Объем
90166	Multipurpose Handling Medium™ Complete (MHM™-C)	Вспомогательные репродуктивные процедуры	100 мл, 500 мл

Назад в раздел